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编号:12624594
大黄素减轻胰腺腺泡AR42J细胞内质网应激的研究(3)
http://www.100md.com 2015年2月1日 中国中药杂志 2015年第3期
     SDS-PAGE电泳:取等量的蛋白样本进行10%SDS-PAGE电泳(分离胶8%,浓缩胶3%),电泳结束后将凝胶中的蛋白转移至PVDF膜,5%脱脂奶粉封闭2 h后,依次加入相应的多克隆抗体、β-actin单抗,4 ℃过夜,加辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔二抗(1∶5 000),室温避光孵育60 min,TBS洗,DAB显色。用Odyssey双色红外荧光扫描系统进行检测及灰度分析, 以目标蛋白显色条带与β-actin条带的灰度比值作为目标蛋白的相对表达量。

    2.5统计处理使用SPSS 15.0统计软件,计量数据以±s表示,组间比较采用方差分析,P<0.05为差异具有统计学意义。

    3结果

    3.1大黄素对AR42J细胞胰蛋白酶、脂肪酶含量的影响CAE联合LPS刺激AR42J细胞3 h后,AR42J细胞裂解液中胰蛋白酶、脂肪酶含量均显著升高(图1 ......
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